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肿瘤抑制血管新生化合物筛选与机制研究（体内和体外）发表时间：2020-08-06 14:39 ² 细胞模型：VEGF诱导人脐静脉HUVECs细胞 ² 方法：（1）MTT法检测不同浓度药物对VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响；（2）采用划痕实验、Transwell侵袭实验和激光共聚焦免疫荧光方法检测药物对VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞迁移和侵袭的影响。（3）通过管形成、球状体成芽、小鼠主动脉环等体外实验研究药物对VEGF刺激后血管新生的影响；（4）采用基质胶栓实验评估药物对VEGF刺激的小鼠体内血管新生的影响；（5）采用分子对接法，在体外模拟药物与VEGFR-2的相互作用。利用Western blot、免疫荧光、免疫共沉淀等手段来探索药物抑制血管生成的潜在机制。 测试内容： ü 体外：VEGF诱导的HUVECs细胞增殖、迁移、侵袭和管形成； 增殖： CCK-8重复3次，共计成本价1000元/个； 迁移：四个给药梯度， VEGF刺激，共计成本价1200元/个； 侵袭：四个给药梯度，成本价3300元/个； 管形成：四个给药梯度，多个复孔，成本价1400元/个 ü 体内：C57/BL6小鼠体内抑制基质胶栓中血管的形成； 分四组（对照，VEGF, 给药，VEGF+给药），每组10只鼠， 成本共计6万元/个 ü 分子机制探讨：对血管新生的影响及其潜在的分子机制明晰。具体需询价 凋亡4000元，激光共聚焦5000元，western 4000元，Co-IP 5000元
² 研究实例一：
Gamabufotalin, a major derivative of bufadienolide, inhibits VEGF-induced angiogenesis by suppressing VEGFR-2 signaling pathway. Oncotarget. 2016 Jan 19;7(3):3533-47. （SCI，6.359） |
